بخش 7.3.2

آنرا به مدت پنج دقیقه به شدت تکان داده، بگذارید کلروفرم و آب به مدت۱۵دقیقه بمانند تا جدا شوند.

لایه پایینی(کلروفرم) را به یک قیف جدا کننده اسکوئیب۱۲۵میلی‌لیتری منتقل کنید که شامل رویه¹ (حدواسط)(رجوع شود به یادآوری۱) و چند میلی‌لیتر لایه آبی است. اطمینان حاصل کنید که تمام رویه(حدواسط) منتقل شده باشد. مقدار لایه آبی منتقل شده را در حد کمینه نگه دارید، زیرا مقدار آب اضافی در قیف۱۲۵میلی‌لیتری می‌تواند منجر به استخراج ناقص رویه شده و باعث امولسیونی شود که به راحتی جدا نمی‌شود. برای اطمینان از استخراج کامل رویه قیف را بشدت تکان دهید. بگذارید تا کلروفرم جدا شود و آنرا به داخل قیف جدا کننده۲۵۰میلی‌لیتری منتقل کنید، که این قیف شامل۵۰میلی‌لیتر آب و چند قطره هیدروکلریک اسید است. اطمینان حاصل کنید که رویه در پشت شیر قیف۱۲۵میلی‌لیتری نگه داشته شود. قیف۲۵۰میلی‌لیتری را تکان دهید.

کلروفرم را به داخل یک قیف۲۵۰میلی‌لیتری دیگر که حاوی۵۰میلی‌لیتر آب و چند قطره هیدروکلریک اسید است، منتقل کنید. این قیف را نیز مانند قیف۲۵۰میلی‌لیتری اولیه تکان دهید. کلروفرم جدا شده را به داخل یک ارلن ته صاف شیردار استاندارد، منتقل کنید(رجوع شود به یادآوری۲). مراقب باشید که آبی، وارد ارلن نشود.

یادآوری۱– معمولاً یک رویه رنگی تیره در سطح میانی مایع وجود داردکه می‌تواند بعد از همزدن، در قیف در جایی که نسبت آب به کلروفرم زیاد است، حاوی ماده آلی قابل حل در کلروفرم باشد که می‌تواند تغلیظ شود و تا حجم کمی با چرخاندن آرام قیف بعد از اینکه رویه به قسمت باریکتر قیف کشیده شد، ثابت نگه داشته شود.

یادآوری۲– مایع بعداً تقطیر می‌شود. در این مرحله در لاستیکی یا چوب پنبه‌ای نباید استفاده شود. یک ارلن۲۵۰ یا۳۰۰میلی‌لیتری مخصوص تجزیه خاک که به وسیله یک رابط مناسب به لوله مبرد وصل است، مناسب می‌باشد. لوله می‌تواند نزدیک گردن ارلن نصب شود و قسمت باقی مانده به یک پوشش خنک‌کن آبی وصل شود. بنابراین کلروفرم بازیافت شده می‌تواند همانطور که در بند۷–۲–۱ بیان شده، دوباره استفاده شود.