بخش 7

محلول‌های آبی متیلن بلو باید هم برای اندازه‌گیری و هم برای آماده‌سازی استفاده شوند. محلول‌های متیلن بلو باید به صورت تازه، با استفاده از آب مقطر از محلول‌های ذخیره (نگهداری شده در تاریکی) و بدون افزودنی‌های دیگر تهیه شوند. غلظت متیلن بلوی ابتداییc₀ برای محلول آزمون بایدc₀=(۱۰±۰/۵) μmol/l باشد. محلول آماده‌سازی باید در غلظتc=(۲۰±۱) μmol/l تهیه شود. جذب،A_λ، محلول‌ها باید از طریق معادله۱ محاسبه شود.

که در آن:
A_λ جذب؛
ε ضریب خاموشی مولی؛
c غلظت؛
d طول.

یادآوری۱– مقادیر جذب در طول اندازه‌گیریd=۱۰ mm، عبارتند ازA_λ,max=۰/۷۴ (برای محلول آزمون) وA_λ,max=۱/۴۸ (برای محلول آماده‌سازی).

یادآوری۲– متیلن بلو (C₁₆H₁₈ClN₃S×3H₂O وM=۳۷۳/۹۰ g/mol) رنگدانه‌ای است که در محدوده طول موج بینλ=۳۵۰ nm وλ=۴۵۰ nm دارای جذب کمی می‌باشد. متیلن بلو در یک محلول آبی با غلظتc=(۱۰±۰/۵) μmol/l دارای ضریب خاموشی مولیε(۶۶۴ nm)=۷۴۰۲/۸ m²/mol می‌باشد (مرجع۲ را ببینید).